Набор питательных сред для ускоренного определения лекарственной чувствительности и первичной идентификации микобактерий туберкулеза (ТБ тест-набор)

ТБ тест-набор предназначен для ускоренного определения лекарственной чувствительности к изониазиду, рифампицину, стрептомицину и этамбутолу и первичной идентификации микобактерий туберкулеза, а также нетуберкулезных микобактерий, обладающих способностью восстанавливать нитраты в нитриты.

Состав набора:

• 8 флаконов с готовой к употреблению питательной средой содержащей нитрат натрия (скошенный гель зеленовато-голубого цвета) №№ 1-7
• 1 флакона № 8 с реактивом Грисса (кристаллический порошок серо-розового цвета)
• 2 стерильных шприцев.

Флаконы завальцованы неокрашенными алюминиевыми колпачками или цветными колпачками в соответствии с таблицей.

Состав ТБ тест-набора:

№ флакона	Содержимое	Цвет колпачка	Количество флаконов
1	Питательная среда - (контроль) - без препаратов	неокрашенный	2
2	Питательная среда с салицилатом натрия, 1 мг/мл	черный	1
3	Питательная среда с (TКГ), 2 мкг/мл	белый	1
4	Питательная среда с изониазидом, 1 мкг/мл	синий	1
5	Питательная среда с рифампицином, 40 мкг/мл	красный	1
6	Питательная среда со стрептомицином, 10 мкг/мл	зеленый	1
7	Питательная среда с этамбутолом, 2 мкг/мл	желтый	1
8	Реактив Грисса	неокрашенный	1
	Шприц стерильный объемом 1 мл для посева		1
	Шприц стерильный объемом 5 мл		1

 

Определение лекарственной чувствительности и первичная идентификация микобактерий туберкулеза основаны на выявлении нитратредуктазной активности.

Подготовка ТБ тест-набора зависит от способа посева культур.

• При посеве шприцем снимают центральную часть алюминиевого колпачка флаконов №№1-7, затем стерильной иглой от шприца объемом 5 мл в асептических условиях прокалывают резиновую пробку для дополнительной аэрации.
• При посеве пипеткой в асептических условиях флаконы №№1-7 освобождают от метал-лических колпачков и резиновых пробок и перекрывают стерильными резиновыми коническими пробками.

Посев культур M.tuberculosis проводят в соответствии с приложением к Приказу МЗ РФ №109 «Инструкция по унифицированным методам микробиологических исследований при выявлении , диагностике и лечении туберкулеза», высевая по 0,2 мл микробной взвеси с концентрацией 5х10⁷мк/мл во флаконы №№1 -7 с питательными средами. После посева с помощью шприца резиновую крышку каждого флакона обрабатывают в течение 5 минут ватным тампоном, смоченным в растворе дезсредства. Затем засеянные флаконы инкубируют при температу-ре (37±1)ºС в течение 8-14 суток в наклонном положении таким образом, чтобы инокулят равномерно распределялся по всей поверхности скоса среды. Для этого их помещают в упаковочную коробку с предварительно выдавленной перфорированной стенкой.

Учет результатов проводят визуально с реактивом Грисса. Непосредственно перед проведением учета результатов готовят 7,5-ный % раствор реактива Грисса путем добавления 5 мл дистиллированной воды, подогретой до температуры 50 ºС, к содержимому флакона № 8. Приготовленный раствор можно использовать в течение 14 суток при условии хранения его при температуре 2-8ºC, в темном месте.

 Учета результатов.Через 8 суток инкубирования посевов в один из двух контрольных флаконов добавляют 0,5 мл раствора реактива Грисса с помощью шприца объемом 5 мл. Учитывают появление розовой или фиолетовой окраски во флаконах по цветовой шкале.

Возможны 3 варианта интенсивности окраски в контрольном флаконе:

1. Если в контрольном флаконе интенсивность розовой или фиолетовой окраски не менее 3+, то продолжают внесение раствора реактива Грисса во все оставшиеся флаконы и регистри-руют интенсивность окраски.
2. Если в контрольном флаконе интенсивность окраски будет слабо-розовой или слабо-фиолетовой (менее 3+), этот флакон уничтожают, а все остальные флаконы тест-набора про-должают инкубировать до 10 суток. – 12 суток.
3. Если в контрольном флаконе не будет появления розовой или фиолетовой окраски, этот флакон уничтожают, а все остальные флаконы ТБ тест-набора продолжают инкубировать до 12 -14 суток.

По истечении срока инкубации: через 10 -12 суток для варианта 2 и через 12 – 14 суток для варианта 3,- вносят раствор реактива Грисса во все оставшиеся флаконы и проводят учет результатов. 

Не инкубировать флаконы ТБ тест-набора более 14 суток, т.к. возможно получение ложноположительных результатов.

Интерпретация результатов. Культура считается чувствительной, если во флаконе с лекарственным препаратом не произошло появления розовой или фиолетовой окраски (при интенсивности окраски в кон-трольном флаконе не менее 3+). Культура считается устойчивой, если во флаконе с лекарственным препаратом произо-шло появление розовой или фиолетовой окраски (при интенсивности окраски в контрольном флаконе не менее 3+).

Первичная идентификация микобактерий туберкулеза осуществляется через 8-14 суток инкубирования посевов по появлению розовой или фиолетовой окраски во флаконе №3 с ТКГ и отсутствию окраски во флаконе №2 с салицилатом натрия после внесения раствора реактива Грисса (при интенсивности окраски в контрольном флаконе не менее 3+).

Хранение: в защищенном от света месте при температуре 2-8 ºС.

Срок годности - 3 месяца.

Цена дана с учетом НДС за 1набор.

Написать отзыв

Ваше Имя:


Ваш отзыв: Внимание: HTML не поддерживается! Используйте обычный текст.

Оценка: Плохо           Хорошо

Введите код, указанный на картинке: